Cy5是一种常见近红外荧光染料，发射波长约680 nm，荧光稳定性较好、穿透性较强，常用于生物检测和医学诊断研究。碘海醇是一种CT造影剂。Cy5-碘海醇纳米颗粒是将Cy5与碘海醇结合形成的复合体系，可实现荧光成像与CT成像互补，提高定性、定位观察的灵敏度和影像诊断的全面性、准确性，同时降低游离状态下可能的毒副作用。

Cy5-碘海醇荧光纳米颗粒样品动态光散射是表征纳米颗粒粒径的常用手段。该样品荧光发射波长正好覆盖动态光散射光源波长，因此可在光路中使用窄带滤光片，过滤去除激光波长外的其他波长散射光，以最大限度限制荧光效应对粒径测试的影响。

图1. BeNano窄带滤光片微量池套件

本报告使用丹东百特BeNano 90 Zeta纳米粒度及Zeta电位分析仪，使用安装了窄带滤光片的去荧光微量池，检测分散在水性环境中的Cy5-碘海醇纳米颗粒粒径信息。

BeNano 90 Zeta纳米粒度及Zeta电位分析仪

原理和设备

BeNano 90 Zeta使用波长671 nm、功率50 mW激光器作为光源。动态光散射光路收集90°散射光，通过相关计算得到原始相关曲线信号，进而推导颗粒布朗运动速度，由斯托克斯-爱因斯坦方程得到颗粒粒径和粒径分布信息。

样品制备和测试条件

检测两个Cy5-碘海醇纳米颗粒样品，分别在原液状态下进行动态光散射测试。通过BeNano 90 Zeta内置温度控制系统，将测试温度控制为25℃±0.1℃，在90°角度测试。样品注入安装了窄带滤光片的荧光微量池，每个样品仅需16 μL。同时用常规样品池进行对比测试。每个样品放入样品池后至少测试三次，以检测结果重复性并得到标准偏差。

测试结果和讨论

图2. 1#样品三次测试的相关曲线(上图)和粒径分布(下图)

图3. 2#样品三次测试的相关曲线(上图)和粒径分布(下图)

图4. 两个样品用常规PS样品池的相关曲线(1#上图，2#下图)

图2、图3分别为1#和2#样品三次测试的相关曲线和粒径分布。样品三次测试相关曲线重复性较好，粒径分布重复性较好，表明去荧光微量池能够消除荧光影响。

图4为两个样品用常规样品池测试的相关曲线。1#样品由于荧光信号影响，得不到合理相关曲线，未能看到相关曲线相关性衰减；2#样品相关曲线截距极低。两种情况都测不到粒径结果，间接表明去荧光微量池能有效避免荧光效应影响。

表1.　两个样品的粒径测试结果

表1列出两个样品的粒径测试结果。两个样品粒径结果重复性较好，标准差较小，表明该类样品可使用去荧光微量池得到较好且接近真实的粒径结果。

丹东百特BeNano 90 Zeta配合窄带滤光片微量池，可为荧光纳米颗粒粒径表征提供有效方案。